【制法】取山楂叶,粉碎成粗粉,加50%乙醇提取两次(55~60°C),每次2小时,第一次加10倍量,第二次加8倍量,滤过,合并滤液,回收乙醇至滤液无醇味,用等量水稀释,通过D101大孔吸附树脂柱,依次用水及不同浓度的乙醇洗脱,收集相应的洗脱液,回收乙醇,浓缩至相对密度约1、10(60°C)的清膏,喷雾干燥,即得。
【性状】本品为浅棕色至黄棕色的粉末;气特异,味苦,有引湿性。
【鉴别】取本品5mg,用甲醇2ml溶解,滤过,滤液作为供试品溶液。另取牡荆素鼠李糖苷对照品,加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(通则0502)试验,吸取上述两种溶液各2~3μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以乙酸乙酯-甲醇-水(25∶5∶3)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。
【检查】干燥失重取本品1g,精密称定,置干燥至恒重的称量瓶中,在硫酸干燥器中干燥24小时,减失重量不得过2、0%(通则0831)。
【特征图谱】照高效液相色谱法(通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以四氢呋喃-甲醇-乙腈-乙酸-水(38∶3∶3∶4∶152)为流动相;检测波长为330nm。理论板数按牡荆素鼠李糖苷峰计算应不低于2500。
参照物溶液的制备取牡荆素鼠李糖苷对照品适量,精密称定,加60%乙醇制成每1ml含100μg的溶液,即得。
供试品溶液的制备取本品50mg,精密称定,置50ml量瓶中,加60%乙醇溶解并稀释至刻度,即得。
测定法分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,记录色谱图,即得。
供试品特征图谱中应呈现4个特征峰,与参照物峰相应的峰为S峰,计算各特征峰与S峰的相对保留时间,应在规定值的±5%范围之内。相对保留时间规定值为:0、76(峰1)、1、00(峰S)、l、55(峰2)、1、94(峰3)。
积分参数斜率灵敏度为5,峰宽为0、04,最小峰面积为10,最小峰高为S峰峰高的1%。
【含量测定】总黄酮对照品溶液的制备取芦丁对照品适量,精密称定,加乙醇制成每1ml含芦丁0、20mg的溶液(必要时超声处理使溶解),即得。
标准曲线的制备精密量取对照品溶液1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml,分别置25ml量瓶中,各加水至6ml,加5%亚硝酸钠溶液1ml,使混匀,放置6分钟,加10%硝酸铝溶液1ml,摇匀,放置6分钟,加氢氧化钠试液10ml,再加水至刻度,摇匀,放置15分钟,以相应的试剂为空白,照紫外-可见分光光度法(通则0401),在500nm的波长处测定吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。
测定法取本品0、15g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入稀乙醇25ml,密塞,摇匀,超声处理5分钟,放置3小时以上,滤过,精密量取续滤液2ml,置25ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液。精密量取供试品溶液2ml,置25ml量瓶中,照标准曲线的制备项下的方法,自“加水至6ml”起,依法测定吸光度,同时精密量取供试品溶液2ml,置25ml量瓶中,加水至刻度,摇匀,作为空白溶液。从标准曲线上读出供试品溶液中芦丁的量,计算,即得。
本品按干燥品计算,含总黄酮以芦丁(C27H30O16)计,不得少于80、0%。
牡荆素鼠李糖苷照高效液相色谱法(通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验同〔特征图谱〕项下。
对照品溶液的制备取牡荆素鼠李糖苷对照品适量,精密称定,加60%乙醇制成每1ml含100μg的溶液,即得。
供试品溶液的制备取本品50mg,精密称定,置50ml量瓶中,加60%乙醇溶解并稀释至刻度,即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
本品按干燥品计算,含牡荆素鼠李糖苷(C27H30O14)不得少于8、8%。
【贮藏】密封,置阴凉干燥处。
【制剂】益心酮片益心酮滴丸益心酮分散片